酶底物法水質(zhì)檢測(cè)儀憑借其快速、準(zhǔn)確、便捷的特點(diǎn),已成為水質(zhì)微生物監(jiān)測(cè)的重要工具。以下是其操作流程與注意事項(xiàng)的實(shí)用指南,確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
一、操作流程
?。ㄒ唬悠窚?zhǔn)備
取樣:使用配套的100mL無(wú)菌取樣瓶準(zhǔn)確量取水樣。如果水樣中含氯(如自來(lái)水),需加入適量硫dai*中和余氯,防止其抑制目標(biāo)菌生長(zhǎng)導(dǎo)致假陰性。
加入培養(yǎng)基:向取樣瓶中加入酶底物法檢測(cè)試劑(如MMO-MUG培養(yǎng)基),輕輕搖晃瓶子,確保培養(yǎng)基wan全溶解。
?。ǘ┒勘P選擇與填充
選擇定量盤:根據(jù)預(yù)估的菌群濃度,選擇51孔定量盤(檢測(cè)范圍寬)或97孔定量盤(精度更高)。將混合好的水樣均勻倒入定量盤的孔內(nèi)。
封膜:使用程控定量封口機(jī)對(duì)定量盤進(jìn)行熱封膜,確保封膜平整、無(wú)氣泡、無(wú)滲漏,為培養(yǎng)創(chuàng)造密閉環(huán)境。
?。ㄈ┡囵B(yǎng)
溫度設(shè)置:
檢測(cè)總大腸菌群或大腸埃希氏菌時(shí),將定量盤置于36℃±1℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
檢測(cè)糞(耐熱)大腸菌群時(shí),需在44.5℃±0.2℃的恒溫水浴或培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
注意事項(xiàng):培養(yǎng)溫度的準(zhǔn)確性至關(guān)重要,微小的溫度偏差會(huì)顯著影響耐熱菌群的檢測(cè)結(jié)果,務(wù)必使用經(jīng)校準(zhǔn)的溫度計(jì)監(jiān)控培養(yǎng)溫度。
?。ㄋ模┙Y(jié)果判讀
觀察顏色變化:培養(yǎng)結(jié)束后,在合適光線下觀察定量盤:
黃色孔:指示總大腸菌群(36℃)或糞大腸菌群(44.5℃)存在。
熒光孔(需紫外燈):指示大腸埃希氏菌存在。
定量分析:根據(jù)顯色或發(fā)熒光的孔數(shù),查閱儀器提供的MPN(最大可能數(shù))表進(jìn)行定量計(jì)算,得出菌群濃度(MPN/100mL)。
二、注意事項(xiàng)
?。ㄒ唬悠诽幚?/div>
避免污染:確保取樣瓶、定量盤和操作環(huán)境的清潔,避免人為污染。
及時(shí)檢測(cè):采集的水樣應(yīng)盡快檢測(cè),避免長(zhǎng)時(shí)間存放導(dǎo)致微生物數(shù)量變化。
?。ǘ┰噭┡c設(shè)備
試劑質(zhì)量:使用高質(zhì)量的酶底物法檢測(cè)試劑,確保反應(yīng)的特異性。
設(shè)備校準(zhǔn):定期校準(zhǔn)培養(yǎng)箱和封口機(jī),確保其溫度和操作參數(shù)的準(zhǔn)確性。
(三)結(jié)果準(zhǔn)確性
平行實(shí)驗(yàn):進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn),確保結(jié)果的重復(fù)性和可靠性。
質(zhì)量控制:使用質(zhì)控樣進(jìn)行定期檢測(cè),驗(yàn)證檢測(cè)系統(tǒng)的準(zhǔn)確性。
三、總結(jié)
酶底物法水質(zhì)檢測(cè)儀為多種水體類型提供了快速、準(zhǔn)確定量的微生物指標(biāo)檢測(cè)方案。掌握規(guī)范的操作流程和注意事項(xiàng),是確保檢測(cè)數(shù)據(jù)科學(xué)可靠、有效服務(wù)于水質(zhì)安全評(píng)估與管理的關(guān)鍵。通過(guò)合理準(zhǔn)備樣品、準(zhǔn)確操作設(shè)備和嚴(yán)格控制培養(yǎng)條件,可以充分發(fā)揮酶底物法的優(yōu)勢(shì),為水質(zhì)監(jiān)測(cè)提供有力支持。